Nouvelle méthode rapide et robuste de génotypage du CYP2C9 et MDR1

2003 
Certains polymorphismes de sequence du genome (SNP) peuvent affecter significativement le phenotype chez l’homme. La detection de patients porteurs de variants alleliques est devenue un des objectifs des etudes de pharmacologie clinique afin d’evaluer les relations phenotypes-genotypes. Cependant il est absolument necessaire de disposer d’une methode rapide et robuste de genotypage. Le but de notre etude etait de valider une nouvelle methode rapide de genotypage du cytochrome P450 2C9 (CYP2C9) et du gene MDR1 (multidrug resistance). Les genotypes CYP2C9 et MDR1 ont ete determines par les methodes de references puis compares a la technique de discrimination allelique utilisant des sondes fluorescentes Taq Man ®. Seize sujets porteurs des differents variants alleliques CYP2C9*2 et CYP2C9*3 (heterozygotes et homozygotes) precedemment sequences et 55 sujets genotypes pour le SNP situe sur l’exon 26 du gene MDR1 (C3435T), genotypes par la technique de reference PCR-RFLP, ont tous ete genotypes par PCR fluorescente. Les resultats montrent que la PCR fluorescente concorde a 100 % avec les resultats obtenus grâce aux techniques de reference. Le genotypage pour chaque SNP a ete repete trois fois consecutives et les resultats des genotypes sont apparus constants pour les trois SNP. La discrimination allelique basee sur une PCR fluorescente a donne une entiere satisfaction pour le genotypage du CYP2C9 et MDR1. Cette technique est rapide, robuste et facilement utilisable en routine au laboratoire de pharmacologie, elle peut etre aussi appliquee facilement a la detection d’autres SNP.
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