pCKM-mPTH recombinant plasmid therapy for hypoparathyroidism by polycationic liposome-mediated transfection

目的 探讨多价阳离子脂质体介导的pCKM-mPTH质粒治疗甲状旁腺功能低下症(HPT)的最佳方案.方法用DNaseⅠ敏感性试验测定脂质体对质粒的保护作用,用不同比例的脂质复合物及裸质粒进行体内外转染,收集细胞培养液和血清,采用放射免疫法测定其甲状旁腺激素(PTH)含量.结果脂质复合物比例为2∶ 1时,即对DNA有明显的保护作用;在体外转染实验中,复合物比例在3∶ 1时PTH表达量最高,为每24小时(16.4±4.8)pg/10 000细胞,而在此比例下pCKM-mPTH质粒达20 μg/100 μl时,模型体内PTH的血清浓度最高,为35.9 pg/ml±2.2 pg/ml.结论与裸质粒相比,多价阳离子脂质体更适宜于作为HPT基因治疗的非病毒载体,而其介导重组质粒pCKM-mPTH直接转染肌肉的良好效能取决于脂质复合物的构成比例和剂量。