Disulfure-isomerase de proteine de levure recombinee et son procede de preparation

1998 
L'invention concerne un procede pour preparer une disulfure-isomerase de proteine de levure recombinee biologiquement active, consistant a a) modifier un gene codant pour la disulfure-isomerase de proteine de levure de telle maniere que ce gene subisse la deletion, la substitution ou l'addition d'une ou plusieurs bases dans la region codant pour un signal de localisation du reticulum endoplasmique pour ainsi ne pas coder tout ou partie du signal de localisation, b) integrer le gene modifie dans un vecteur d'expression, c) transformer les cellules hotes avec le vecteur resultant, et d) mettre en culture les cellules hotes transformees dans un milieu tout en maintenant le pH de ce milieu au voisinage de la neutralite, secretant ainsi la disulfure-isomerase de proteine dans un etat actif a partir des cellules hotes. Ce procede permet de secreter la disulfure-isomerase de proteine de levure recombinee, dans un etat biologiquement actif, en grande quantite dans le milieu et de la recuperer a l'aide d'une technique de purification simple et pratique.
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