CB. Determinação da Concentração inibitória mínima (CIM90) e do índice de seletividade (IC50) de compostos benzofuroxanos promissores para o tratamento da Tuberculose

Introducao: A tuberculose (TB), causada pela bacteria intracelular Mycobacterium tuberculosis, e a doenca infectocontagiosa mais mortal do mundo, que acomete principalmente os pulmoes do individuo infectado. Seu tratamento, de acordo com a Organizacao Mundial da Saude (OMS), consiste em seis meses de uso continuo de antibioticos de primeira linha (rifampicina, isoniazida, pirazinamida e etambutol). Porem, ja existem cepas resistentes a alguns desses antibioticos, e ate mesmo todos eles. Somado a isso, esse tratamento e muito longo e possui varios efeitos adversos. Assim, fica clara a necessidade de novas moleculas para o combate a essa doenca. As moleculas benzofuroxanas foram sintetizadas, a partir de um composto lider ja ativo contra essas micobacterias, por hibridrizacao molecular com a linezolida, farmaco que possui acao contra M. tuberculosis. Com isso, neste trabalho, buscamos analisar a atividade dessas moleculas determinando a CIM90 de cada uma, seguido da analise do Indice de Citotoxicidade frente a linhagens fibroblasticas MRC-5. Objetivo: Determinacao da Concentracao Inibitoria Minima (CIM90) dos benzofuroxanos e do Indice de Citotoxicidade (IC50) frente a linhagens de fibroblastos MRC-5 e determinacao do Indice de seletividade (IS=IC50/CIM90). Metodologia: Inicialmente, foi realizado a avaliacao da CIM90 para todos os compostos benzofuroxanos pela metodologia do REMA, que consiste na diluicao dos compostos a partir de 10 mg/mL em placas de 96 pocos juntamente com 100 µL de micobacteria a 3 x105 UFC/mL para posterior revelacao com resazurina. Ja o IC50 e feito pelo Ensaio de Citotoxicidade, o qual possui tres etapas, sendo elas o plaqueamento das celulas fibroblasticas, tratamento com os compostos em diferentes diluicoes, e, por fim, a analise dos resultados obtidos atraves da leitura da fluorescencia, utilizando-se resazurina. Para ambos os ensaios, o controle utilizado foi Rifampicina. A determinacao do IS e realizada por meio da divisao do valor do IC50 sobre CIM90 e para compostos promissores, o resultado obtido deve ser > 10. Resultados e discussao: A CIM90 e definida como a menor concentracao na qual ha 90% de inibicao de crescimento de micobacterias. Nesse ensaio os compostos obtiveram CIM90 que variaram entre 0,04 e 14,6 µg/mL. O Ensaio de Citotoxicidade e utilizado para saber se o composto e toxico ou nao para as celulas testadas. Na determinacao do IC50 (indice para observar qual concentracao do composto inibe a viabilidade celular em 50%), dos 19 compostos avaliados, 13 apresentaram valores > 100 g/mL, sendo que 17 demonstraram IS > 10. Conclusao: Frente aos resultados obtidos, conclui-se que os benzofuroxanos sao promissores compostos para a pesquisa de novos farmacos para o tratamento da Tuberculose visto que sao ativos contra a M. tuberculosis e nao toxicos para a linhagem celular MRC-5, apresentando alta seletividade.