RISK信号通路在1-磷酸鞘氨醇后适应减轻心肌细胞缺氧／复氧损伤中的作用

目的研究再灌注损伤挽救激酶（reperfusion injury salvage kinase，RISK）信号通路在1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate，S1P）后适应减轻H9c2心肌细胞缺氧／复氧损伤中的作用。方法将H9c2细胞随机分为7组，即（1）正常对照组（C）；（2）缺氧／复氧组（H／R）；（3）S1P组；（4）S1P＋LY294002组（S1P＋LY）；（5）LY组；（6）S1P＋PD98059组（slP＋PD）；（7）PD组。采用MTT法测定各组细胞存活率；比色法测定丙二醛（MDA）含量、总超氧化物歧化酶（T-SOD）和锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）活力；采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子浓度变化；流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率；Westernblot法测定Akt和ERKl／2蛋白的磷酸化水平。结果与H／R组比较，SlP组可明显增加H9c2细胞缺氧／复氧损伤后细胞存活率及凋亡率，增加T-SOD及Mn-SOD活力，降低MDA含量，降低钙离子浓度，增加Akt和ERKl／2磷酸化水平，而P13K／Akt信号通路阻断剂LY294002或ERKl／2阻断剂PD98059可阻断SlP对H9c2的上述作用。结论SlP能够减轻H9c2细胞缺氧／复氧损伤，加入P13K／Akt抑制剂LY294002和ERKl／2抑制剂PD98059均使SlP的保护作用被取消，表明SlP通过RISK信号通路发挥抗H9c2细胞缺氧／复氧损伤作用。