SIMULTANEOUS AND ACCURATE DETERMINATION OF VITAMINS B1, B6, B12 AND ALPHA­ LIPOIC ACID IN MULTIVITAMIN CAPSULE BY REVERSE-PHASE HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHIC METHOD

A simple, precise, rapid and selective reverse phase high performance liquid chromatographic (RP‐HPLC) method has been developed and validated for the simultaneous determination of Benfotiamine (B1) 100 mg, Pyridoxine hydrochloride (B6) 100 mg, Mecobalamin (B12) 1000 mcg and Alpha– lipoic acid 100 mg in multivitamin capsules. The method uses X‐Terra reverse phase (RP‐18, 250 x 4.6 mm, 5 µm) column and gradient elution. The aqueous mobile phase contained 0.05 M phosphate buffer adjusted to pH 2.5 and acetonitrile. Separation and quantification was achieved by changing the proportion of the system linearly with a time‐schedule programme. Detection was carried out in the range of 200 to 600 nm using photodiode array detector and set at 320 nm and further analysis was carried out using a UV detector. This method has been validated and found to be applicable in routine analysis for multivitamin capsules. The precision is exemplified by relative standard deviations of 1.1% for benfotiamine, 0.9% for pyridoxine hydrochloride, 0.7% for mecobalamin and 1.2% for Alpha‐lipoic acid. Good linearity was observed between the concentration of the analytes and peak area with correlation coefficients (R2) of 0.9997, 0.9990, 0.9995, and 0.9998 respectively. Mean recoveries obtained during spiking experiments were in the range of 99.8‐100.2.