Effect of Manganese on cytosolic free calcium concentration in cortical neurons

目的 探讨皮层神经元胞浆游离钙离子浓度在锰(Mn)神经毒性作用中的变化.方法 分离新生Wistar乳大鼠的皮层神经细胞进行体外培养,细胞生长至最佳状态时,予以分组处理.实验分染锰组和未处理组,染锰组分别与含低、中、高浓度氯化锰(MnCl2·4H2O)的培养液共培养,氯化锰的浓度分别为0.2、0.6、1.0 mmol/L.未处理组则为正常培养的皮层神经细胞.各组处理24 h后终止培养,钙离子荧光探针Fluo-3/AM标记后上激光扫描共聚焦显微镜检测荧光强度,以表示游离钙离子浓度,并用图像分析技术进行处理.结果 氯化锰处理后引起皮层神经元胞浆游离钙离子不同程度的超载,中、高浓度锰组神经元的胞浆游离钙离子浓度明显高于低浓度锰组及未处理组,细胞钙离子荧光像素荧光强度增高且呈剂量依赖性,中、高浓度锰组分别为(131.1±16.7)、(183.2±22.9);低浓度锰组为(84.6±10.2),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 钙离子超载与锰的神经毒性有关,且钙离子超载与锰浓度呈剂量-反应关系。