Étude de l’efficacité d’un antidote de type Fab dans les intoxications à la colchicine chez le cochon nain Göttingen utilisé comme modèle de l’intoxication humaine

Objectif L’objectif de cette etude a ete de developper un modele d’intoxication aigue a la colchicine chez le cochon nain Gottingen afin d’evaluer l’efficacite d’un nouvel antidote de type fragment Fab specifique. Methodes La premiere etape a ete de determiner la dose letale dans le modele animal etudie, puis d’evaluer l’efficacite de l’administration a differents temps des fragments Fab sur la survie des animaux. Ceux-ci etaient anesthesies durant toute la duree de l’experience, la fonction cardiaque etant suivie de facon continue (ECG, pression arterielle, rythme cardiaque). Des prelevements sanguins et urinaires ont ete realises afin d’etudier la toxicocinetique de la colchicine avant et apres traitement. Les animaux etaient euthanasies lorsque la pression arterielle moyenne chutait a 45 mmHg ou a la fin de l’etude (48 h), des prelevements d’organe etant alors realises. Une methode originale en LC-MS/MS a ete developpee afin de determiner les concentrations en colchicine libre et totale (libre + fixee au Fab). Resultats La methode de dosage a ete validee dans le sang total et les organes. Elle permet de quantifier la partie libre et la partie fixee a l’antidote de la colchicine. L’utilisation de la colchicine-D3 comme etalon interne (EI) permet de s’assurer du dosage de l’integralite de la colchicine fixee au Fab (disparition de l’EI se fixant au Fab en exces dans le cas contraire). Les premiers animaux ont ete traites par colchicine per os , montrant une importante variabilite inter-individuelle sur les parametres d’absorption ( n  = 4). Une forme intraveineuse a donc ete developpee. Apres essais de plusieurs doses, la dose lethale retenue a ete de 0,25 mg/Kg IV, avec une bonne reproductibilite ( n  = 3) : C max colchicine plasmatique = 273,2 ± 10,7 ng/mL, T 1/2  = 0,21 ± 0,01 h, AUC T0-20h  = 509 ± 69 ng/mL/h, les animaux etant euthanasies a un temps moyen T = 21 ± 2,6 h. Quatre animaux ont ensuite ete traites avec une dose equimolaire de fragments Fab, administree pendant 1h et debutee soit 1 h ( n  = 2), soit 3 h ( n  = 2) apres la fin de l’administration de la colchicine ; tous les animaux ont survecu a 48 h. L’administration de l’antidote etait associee a une disparition de la colchicine plasmatique libre, a une augmentation tres importante de la colchicine totale (AUC T0–20 h  : 4433 ± 607 ng/mL/h et 2047 ± 51 ng/mL/h) et a une augmentation de la quantite cumulee de colchicine eliminee dans les urines (respectivement 50 ± 9 % et 43 ± 0 % vs 30 ± 4 %). On observe donc une redistribution importante de la colchicine depuis le compartiment tissulaire vers le compartiment sanguin et les urines, d’autant plus que l’administration est precoce, evitant probablement les effets toxiques cellulaires de la colchicine. Une administration 7 h apres la colchicine n’a pas permis la survie des cochons. Conclusion Cette etude a permis de developper un modele reproductible d’intoxication aigue a la colchicine dans un modele porcin. Une redistribution importante de la colchicine est observee des tissus vers le compartiment sanguin puis les urines apres administration precoce de fragments Fab, associee a une baisse de la toxicite et une survie des animaux. L’etude clinique permettant d’evaluer cet antidote chez l’homme, sa pharmacocinetique, son rythme d’administration, de definir son efficacite et son innocuite dans le traitement des intoxications a la colchicine est en cours d’elaboration.