山羊卵巢富集chi-miR-100f-5p的鉴定与表达分析

[目的]探讨山羊卵巢中富集的miR-100及预测的靶基因与山羊卵巢功能及卵泡发育的潜在关系，为山羊繁殖机理研究提供数据。[方法]以山羊卵巢组织为材料，通过miRNA的分离、克隆及测序得到山羊卵巢中表达的miR-100，采用RT—qPCR进行表达检测，用生物信息学方法预测miR-100的靶基因及其功能。[结果]①山羊卵巢的测序结果中，-段成熟体为2Int的序列与果蝇dan—miR-100高度同源，将其命名为ohi-miR-100f-5p，其前体位于基因组负（-）链上，长度为59bp，定位于山羊CM000899．1：33997894—33997914序列；②chi—miR-100f-5p在山羊卵巢、垂体及心脏等组织中均有表达，说明此miRNA不是卵巢组织所特有；心脏和垂体组织中均有较高表达，其次是卵巢，而在肝脏、脾脏、肺及肾脏中表达显著低于卵巢（P〈0．01）；在单产羔内蒙古绒山羊卵巢中chi-miR-100f-5p的表达极显著高于高繁殖力大足黑山羊卵巢（尸〈0．01）；③chi—miR-100f-5p主要靶作用于整合蛋白D1亚基基因及垂体特异性转录因子1基因，可能参与整合蛋白信号通路，促进垂体内分泌细胞的生长与分化，调节下丘脑-垂体-性腺轴激素分泌。[结论]山羊卵巢中新发现的chi—miR-100f-5p可能是与繁殖调控有关的重要候选miRNAs之-。