不结球白菜 BrCDF1 的功能研究

目的本文旨在研究不结球白菜 BrCDF1 基因的功能，验证其与CO启动子之间的调控关系，以及其在植物抽薹开花中所起的作用。 方法以不结球白菜‘苏州青’为材料，采用酵母单杂交技术，验证BrCDF1转录因子与 CO 启动子是否能够结合；构建过表达载体pEarlyGate101- BrCDF1 ，利用农杆菌介导法将过表达载体导入拟南芥中，筛选阳性苗，同时对阳性苗进行Western blot检测，观察转基因植株的表型变化；采用RT-qPCR技术，检测 BrCDF1 、 CO 、 FT 基因在转基因和野生型植株中不同时间点的相对表达量。 结果酵母单杂交和 β -半乳糖苷酶试验分析结果显示，BrCDF1转录因子和 CO 启动子之间具有较高的结合活性。Western blot检测结果表明：转基因拟南芥植株中的BrCDF1蛋白成功表达。RT-qPCR结果表明， BrCDF1 基因在转基因植株中的相对表达量比野生型植株高； CO 、 FT 基因在转基因植株中的相对表达量比野生型低，同时 BrCDF1 过表达植株较野生型开花晚。 结论 BrCDF1 转录因子能与CO启动子结合，从而抑制 CO、FT 基因的表达，进而影响不结球白菜光周期开花途径。