Procede et dispositif de detection en temps reel de produits d'amplification d'acides nucleiques

Systeme destine a effectuer des mesures en temps reel, basees sur la fluorescence, de produits d'amplification d'acides nucleiques. Dans un mode de realisation prefere de la presente invention, un faisceau d'excitation est focalise dans un melange de reaction a travers une surface, ledit melange de reaction contenant (i) un premier indicateur fluorescent capable de generer un premier signal fluorescent dont l'intensite est proportionnelle a la quantite de produit d'amplification dans le volume de melange de reaction illumine par le faisceau d'excitation, et (ii) un second indicateur fluorescent reparti de maniere homogene dans le melange de reaction capable de generer un second signal fluorescent proportionnel au volume de melange de reaction illumine par le faisceau d'excitation. De preference, le faisceau d'excitation est focalise dans le melange de reaction par une lentille a travers une partie d'une paroi d'une chambre de reaction fermee contenant le melange de reaction. La meme lentille est utilisee pour recueillir les premier et second signaux fluorescents generes par les premier et second indicateurs, respectivement, en reponse au faisceau d'excitation. Le rapport des intensites de fluorescence des premier et second signaux fluorescents fournit un indicateur quantitatif stable de la quantite de produit d'amplification synthetise au cours de la reaction d'amplification.