Methode d'amplification par cercle roulant pour analyse d'acides nucleiques

2001 
L'invention concerne un procede et des reactifs utiles dans l'analyse de sequences d'acides nucleiques. Dans ce procede, une pluralite de sondes cadenas sont utilisees. Chaque sonde cadenas peut s'hybrider a un locus d'acide nucleique cible dans des conditions d'hybridation. Si un variant voulu est present au locus, la sonde cadenas peut etre ligaturee pour former un cercle d'amplification voulu. Le cercle d'amplification voulu sert de modele pour la production d'ADN a sequences repetees en tandem. L'ADN a sequences repetees en tandem peut etre ensuite digere en fragments de detection non repetes en tandem, qui sont ulterieurement separes et detectes. La pluralite de sondes cadenas est concue de sorte que la ligature des sondes, l'amplification du cercle voulu et la digestion de l'ADN a sequences repetees en tandem produite, ainsi que la detection peuvent toutes etre mises en oeuvre avec le meme jeu de reactifs. Chaque sonde cible un variant de locus unique sur la sequence d'acides nucleiques voulue, et produit un fragment de detection pouvant etre distingue parmi des fragments de detection produits par d'autres sondes cadenas de la pluralite de sondes cadenas, au moyen d'un detecteur d'analyse de fragments.
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