Place de l’identification des leishmanies par la polymerase chain reaction – restriction fragment length polymerase dans l’étude de l’épidémiologie des leishmanioses cutanées en Tunisie

2014 
Resume But Trois formes de leishmaniose cutanee (LC) sont decrites en Tunisie. L’identification des especes en cause est utile aussi bien pour preciser les donnees epidemiologiques que pour la prise en charge des cas. L’objectif de ce travail est d’evaluer la technique de PCR-RFLP dans l’identification des especes de leishmanies responsables des 3 formes de LC rencontrees en Tunisie et de confronter les resultats de cette technique a ceux de l’electrophorese des isoenzymes. Patients et methodes Soixante et une lesions de LC ont ete prelevees. Les prelevements dermiques ont ete mis en culture sur milieu NNN et analyses par PCR ciblant la region ITS1 de l’ADN ribosomal. L’identification d’espece a ete realisee par electrophorese des isoenzymes pour les cultures positives et par analyse du profil de restriction des produits de PCR. Resultats La culture etait positive pour 38 (62 %) prelevements. Le typage iso-enzymatique de 32 isolats a identifie 3  L. infantum , 23  L. major MON-25 et 6  L. tropica MON-8. La PCR etait positive pour 60 prelevements (98,4 %). L’analyse du profil de restriction a permis d’identifier l’espece dans 56 cas : 12  L. infantum , 38  L. major et 6  L. tropica . Les resultats de la PCR-RFLP etaient concordants avec ceux du typage iso-enzymatique pour les 32 souches identifiees par les 2 techniques. Toutes les identifications etaient compatibles avec la distribution geographique des 3 formes de LC endemiques en Tunisie. Conclusion Les resultats de la PCR-RFLP sont parfaitement correles a ceux du typage iso-enzymatique dans l’identification des leishmanies responsables de LC en Tunisie. Cette technique se confirme une alternative de choix grâce a sa simplicite, sa rapidite d’execution et surtout sa pratique directement sur les prelevements lesionnels.
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