Contribution a l'etude structurale de proteines impliquees dans la transcription/reparation de l'adn

Le facteur general de transcription tfiih est compose d'au moins neuf sous-unites dont la plupart sont egalement impliquees dans la reparation de l'adn par excision des nucleotides (ner). Parmi ces sous-unites, nous nous sommes interesses a l'helicase p89/xpb et a la sous-unite p62. Nous avons defini les motifs conserves de la sous-famille des proteines homologues a p89/xpb et identifie chez p62 un motif conserve dans d'autres familles de proteines. Une etude biochimique de la proteine p89/xpb entiere et de ses differents domaines a ete menee dans l'optique d'une etude structurale. Le domaine n-terminal de la sous-unite p62 a ete caracterise par des techniques biophysiques et marque a l'azote 15 et au carbone 13. La determination de la structure tridimensionnelle de ce domaine par resonance magnetique nucleaire a ete entreprise. La tat binding protein (tbp) est impliquee dans la reconnaissance du promoteur a l'initiation de la transcription, mais aussi dans la reconnaissance des lesions de l'adn induites par le cisplatine, un compose utilise en chimiotherapie des cancers. Nous avons cristallise la tbp en complexe avec un adn platine dans le but d'obtenir sa structure cristallographique et d'etudier les determinants moleculaires de cette interaction. Nous avons etabli une procedure pour analyser le contenu des cristaux par spectrometrie de masse.