Etude des relations structure/fonction des transporteurs plasmiques des catecholamines

Les transporteurs des catecholamines jouent un role essentiel dans le systeme nerveux central : ils sont responsables de la recapture de ces neurotransmetteurs liberes a la synapse et controlent ainsi l'amplitude et la duree de l'action de ces molecules sur leurs recepteurs. De fait, les drogues qui agissent sur ces transporteurs sont de puissants psychotropes (cocaine, amphetamines, antidepresseurs tricycliques, etc). Les transporteurs de la dopamine (dat) et de la noradrenaline (net) sont des proteines qui presentent une forte homologie (68% d'identite de sequence en acides amines) et derivent donc sans doute d'un ancetre commun. Tous deux sont capables de transporter a la fois la dopamine et la noradrenaline et sont sensibles a plusieurs inhibiteurs communs. Cependant, ils se distinguent par leurs affinites respectives pour les antidepresseurs tricycliques : contrairement a dat, net possede une forte affinite pour ces composes. Mon travail de these a consiste a analyser les relations structure/fonction de ces deux transporteurs grace a la mutagenese dirigee et au clonage d'un transporteur homologue chez un poisson teleosteen medaka, oryzias latipes, j'ai pu identifier plusieurs acides amines (hnet-f316, hnet-v556, hnet-s399-g400) impliques dans la liaison a haute affinite des antidepresseurs tricycliques sur net. En utilisant l'hybridation in situ, j'ai pu montrer que le transporteur menet est localise dans les noyaux noradrenergiques du systeme nerveux central de medaka et possede un profil pharmacologique proche de net. Malgre la mise en uvre de techniques appropriees, je n'ai pas pu mettre en evidence de transporteur specifique de la dopamine chez medaka. Ceci semble indiquer qu'au cours de l'evolution, une duplication de genes a partir d'un ancetre commun dat/net, avec l'emergence d'un transporteur dat specifique, se soit produite apres l'apparition des vertebres aquatiques.