猪瘟病毒 NS2-3 抗原集中区基因的原核表达及鉴定

为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV) NS2-3 抗原集中区蛋白，并建立 CSFV 抗体快速 检测方法。本研究以 CSFV 全长基因组质粒为模板，PCR 扩增 NS2-3 抗原表位集中区，利用扩增片段和克隆载体，构建重组表达质粒，命名为 pET32a-NS2-3-1。重组表达质粒转化 Rosetta (DE3)细胞，利用 IPTG 诱导表达，SDS-PAGE 电泳和 Western-blot 鉴定重组表达产物。结果表明，重组质粒 pET32a-NS2-3-1 在 28℃诱导 5 h 得到高效表达，重组蛋白能够与兔抗 CSFV 阳性血清发生反应。获得 CSFV NS2-3 抗原集中区蛋白，并且获得的重组蛋白具有抗原性，能够作为 CSFV 抗体检测的抗原。