Estudo da participação do inflamassoma NLRP3 na resposta inflamatória induzida pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis

Diversos estudos demonstram que a resposta inflamatoria e de extrema importância para o controle da Paracoccidioidomicose (PCM). Essa resposta inflamatoria e iniciada pelo reconhecimento das celulas fungicas por receptores expressos por celulas do sistema imunologico inato. Dentre esses receptores, o NLRP3 foi associado com o reconhecimento de fungos patogenicos em modelos experimentais, atuando em conjunto com o TLR2 e a dectina-1. O NLRP3 atua na formacao de um complexo multiproteico denominado inflamassoma, o qual ativa a caspase-1, que e responsavel pela producao das formas ativas de duas importantes citocinas inflamatorias: a IL-1? e a IL-18. Esse estudo teve por objetivo investigar o envolvimento do NLRP3 na ativacao da resposta inflamatoria de macrofagos e celulas dendriticas humanas (DCs) derivadas de monocitos em resposta ao Paracoccidioides brasiliensis (Pb), alem de avaliar a participacao do NLRP3 na inducao da resposta imunologica adaptativa. Nossos resultados demonstraram que celulas de lesoes de pacientes com PCM (mucosa oral ou linfonodos) apresentam producao de IL-1beta, IL-18 e IL-37 e que macrofagos dessas lesoes sao positivos para Caspase-1 e NLRP3. Tambem fomos capazes de demonstrar que o reconhecimento de celulas leveduriformes por DCs e macrofagos humanos leva a ativacao do inflamassoma NLRP3 e consequente producao de IL-1 e IL-18. Esse reconhecimento envolve a participacao de receptores de superficie (TLR2 e Dectina-1), sendo que a producao dessas citocinas e dependente da sinalizacao via dectina-1 e fosforilacao da proteina Syk. Alem disso, observamos que a ativacao do inflamassoma NLRP3, apos o reconhecimento do fungo, envolve como principais mecanismos a producao de ROS e o efluxo de K+. Nossos dados tambem demonstraram que o inflamassoma NLRP3 e essencial para a diferenciacao de celulas Th17 e Th1 e que sua inibicao leva a um aumento de celulas Th2 e Treg. Em conjunto nossos dados indicam que a ativacao do NLRP3 desempenha um papel importante, tanto na inducao de uma resposta inflamatoria inicial, quanto no desenvolvimento de uma resposta adquirida que pode ser associada a resistencia a infeccao pelo P. brasiliensis. Abstract