Toxinas A e B do Clostridium difficille induzem a expressão diferencial de receptor de Adenosina em células epiteliais intestinais: papel do receptor A2B

O Clostridium difficile e reconhecido por ser uma bacteria nosocomial, levando a intensa inflamacao intestinal, quebra da barreira epitelial e diarreia. A producao de adenosina esta aumenta durante eventos inflamatorios. O receptor de adenosina A2B (A2BR) e o mais expresso no intestino de humanos e camundongos. Nos investigamos o efeito de exposicao as TcdA e TcdB, a curto e longo prazo, em celulas HCT-8 e celulas epiteliais intestinais isoladas do ceco. Celulas HCT-8 foram expostas a TcdA ou TcdB (10 ng/ml) por 2, 6 e 24h. Foi usado o modelo de alca cecal e de infeccao pelo bacilo em murinos para avaliar os efeitos da TcdA e da infeccao pelo C. difficile, respectivamente. Foi demonstrado que HCT-8 e celulas epiteliais intestinais isoladas do ceco naturalmente expressam altos niveis do receptor A2BR. TcdA e TcdB alteraram a morfologia celular, viabilidade e proliferacao e causaram aumento da expressao genica de todos os subtipos de receptores de adenosina e das citocinas IL-6 e IL-8 em HCT-8. Em celulas epiteliais intestinais isoladas do ceco, a TcdA significativamente causou um aumento do peso e volume/comprimento da alca cecal, escores histologicos e infiltrado neutrofilico, medido por MPO, e tambem causou alteracoes da expressao genicas dos receptores de adenosina, tanto no modelo de alca cecal quanto na infeccao pelo bacilo. O tratamento com PSB603, um antagonista do receptor A2BR, foi capaz de reverter os efeitos causados pelas toxinas do C. difficile. Nossos dados suportam a hipotese que as toxinas do C. difficile alteram a expressao dos receptores de adenosina e isso pode estar relacionado com os severos efeitos inflamatorios. Nos concluimos que os receptores de adenosina tenham um papel importante na regulacao da inflamacao em celulas epiteliais intestinais na infeccao pelo C. difficile.