Caracterização fenotípica do camundongo mutante espontâneo tremor utilizando uma bateria de testes comportamentais (projeto em andamento)
2015
Introducao e objetivos: a mutacao espontânea tremor (tr), autossomica recessiva, foi observada na colonia de camundongos Swiss do Bioterio do Departamento de Patologia da FMVZ/USP causando tremores, ataxia e convulsoes. Na analise histopatologica, utilizando-se a coloracao de Luxol Fast Blue foi evidenciada a deficiencia de mielina principalmente nas meninges e camada molecular do cerebelo. Posteriormente, foram realizados dez retrocuzamentos com a linhagem C57BL/6 para mudanca do fundo genetico. Resultados preliminares do mapeamento genetico, efetuado com marcadores microssatelites, indicaram que a mutacao tremor esta situada no cromossomo 14. Com o objetivo de caracterizar o fenotipo dos mutantes tremor sera utilizada uma bateria de testes comportamentais visando observacao do estado geral de saude, dos reflexos neurologicos, das habilidades sensoriais e da funcao motora. Material e metodos: Foram utilizados camundongos machos com oito semanas de idade, dos quais oito mutantes tremor e oito C57BL/6 que nao apresentavam a mutacao para o grupo controle. A caracterizacao fenotipica dos camundongos mutantes abrangeu a avaliacao geral do fenotipo baseando-se em uma bateria de testes comportamentais. Inicialmente, os testes foram realizados no campo aberto e ordenados por parâmetro avaliado, na seguinte sequencia: 1) atividade geral dos animais e sistema sensorial: fremito vocal, irritabilidade, reflexo auricular, aperto de cauda, reflexo corneal e resposta ao toque; 2) testes psicomotores: contorcao, trem posterior, reflexo de endireitamento, tonus corporal e forca de agarrar; 3) avaliacao do sistema nervoso central e autonomo: tremores, convulsoes, cauda em pe, sedacao, anestesia, ataxia, ptose, lacrimacao, miccao e defecacao. Resultados e discussao: em relacao aos camundongos C57BL/6, nos mutantes houve incremento significante nos tremores. Observou-se ainda, aumento na ataxia, e tambem uma maior quantidade de animais que andavam com a cauda em pe, que pode ser um mecanismo compensatorio a sua ataxia para auxiliar com o deficit de equilibrio. Ainda, foi observada a reducao na motilidade e nas frequencias de levantar e grooming. Foi aventada a hipotese de que o aumento do tremor, parâmetro ligado ao sistema nervoso central, tenha sido responsavel pela reducao nos parâmetros psicomotores e da motilidade. Visando a validacao do modelo animal, a partir desses resultados iniciais serao selecionados testes comportamentais mais especificos que auxiliarao na caracterizacao do fenotipo da mutacao. Conclusao: Concluiu-se que o mutante tremor apresenta prejuizos de origem no sistema nervoso central, possivelmente gerados pela falta de mielina, que afetam o seu desempenho motor.
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