靶向COL1A1基因的shRNA对乳腺癌MDA—MB-231细胞体外侵袭与迁移的影响

目的探讨Ⅰ型胶原α1链（COL1A1）基因沉默对人乳腺癌MDA—MB-231细胞侵袭与转移的影响。方法设计2条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体，分别稳定转染乳腺癌MDA-MB-231细胞。用Western blot法筛选抑制效率最高的细胞进行细胞平板集落形成实验、细胞黏附实验、细胞迁移及侵袭实验，观察COL1A1基因对MDA—MB-231细胞黏附、运动及侵袭能力的影响。结果转染pshRNA-COL1A1-2干扰载体的MDA-MB-231细胞COL1A1蛋白表达降低最明显，抑制率达66．98％±2．08％，选择该组细胞作为有效干扰组进行后续实验。pshRNA-COL1A1转染组细胞的集落形成率显著低于空白对照组和阴性质粒pshRNA—scramble转染组（P〈0．05）；细胞黏附实验中pshRNA-COL1A1转染组细胞的吸光度值较对照组明显降低（P〈0．001）；转染pshRNA—COL1A1质粒组细胞的穿膜细胞数也显著低于空白对照组和阴性质粒pshRNA-scramble转染组（P〈0．001）。结论COL1A1基因沉默可在体外抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的黏附、侵袭和迁移。