前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2对胃癌CD44＋细胞增殖和侵袭的影响

目的检测前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44＋细胞的表达情况，研究三者对CD44＋细胞生长和侵袭能力的影响。方法使用CD44免疫磁珠分选技术从胃癌BGC-823细胞中分选出CD44＋细胞，流式细胞仪（FCM）和免疫荧光检测CD44＋细胞中CD44的表达，以鉴定分选是否成功。FCM细胞周期分析和无血清培养，检测CD44＋细胞的干细胞特性。流式细胞仪检测前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44＋细胞、BGC-823细胞和CD44-细胞表达的差异。MTT法和Boyden小室实验研究3者对CD44＋细胞生长和侵袭能力的影响。结果流式细胞仪和细胞免疫荧光结果提示：CD44＋细胞中CD44阳性率为（90．20±2．24）％，显著高于BGC-823细胞[（9．57±2．35）％，P〈0．01]；CIM4＋细胞组处于G0／G1期的细胞为（71．1±5．6）％，显著高于BGC-823细胞组[（47．7±3．5）％，P〈0．05]；在无血清培养7d后，CD44＋细胞能够形成圆形克隆球，而CD44-细胞不能形成圆形克隆球；流式细胞仪显示前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2在CD44＋细胞中高表达，明显高于在BGC-823细胞和CD44-细胞的表达水平（P〈0．01）；Pearson相关性分析显示：三者的表达率呈正相关关系（P〈0．01）。高浓度的前胃泌素mAb和膜联蛋白2mAb能够抑制CD44＋细胞的生长和侵袭，与对照组相比差异显著（P〈0．05）。胃泌素mAb不能抑制CD44＋细胞的生长和侵袭，与对照组相比差异不显著（P〉0．05）。结论CD44＋细胞中高表达前胃泌素、胃泌素、膜联蛋白2，并且前胃泌素mAb和膜联蛋白2mAb能够抑制CD44＋细胞的生长和侵袭能力，提示前胃泌素与膜联蛋白2能够促进CD44＋细胞的生长和侵袭。