P196: Potentialisation par l’acide α-lipoique des effets géniques « exercice-mimétiques » de la voie PPARβ/Δ

Introduction et but de l’etude La sensibilite des voies de signalisation aux signaux moleculaires conditionne la qualite de l’ajustement metabolique et de la reponse adaptative a l’exercice physique. Celle-ci est entre autres determinee par le statut « redox ». Plusieurs evidences nous conduisent a penser que PPARβ/Δ, un facteur controlant la transcription de genes du metabolisme des acides gras, de la differenciation cellulaire et de l’inflammation par des mecanismes trans-activationnels (ligand-dependants) et trans-repressionnels (interaction avec NFκB), est implique dans l’adaptation a l’exercice aerobie. Nous emettons l’hypothese qu’un apport en acide α-lipoique (α-LA), un puissant antioxydant, module la reponse transcriptionnelle de PPARβ/Δ par des mecanismes impliquant les voies moleculaires du stress. Materiel et methodes Nous avons maintenu des myotubes C2C12 et C2C12 surexprimant PPARβ/A ou PPARβ/A-DN dans des conditions standards ou « stressantes ». Ces cellules ont ete traitees avec de l’α-LA (50 a 500 μM) et/ou du GW0742 (agoniste specifique de PPARβ/A ; 0,3 a 300 nM) pendant 48 h et/ou par des inhibiteurs specifiques de voies moleculaires du stress. L’activite agoniste de l’α-LA sur PPARp/A a ete mesuree dans un systeme de transfection des cellules HEK293 par un vecteur PPRE-Luciferase. Les analyses ont ete effectuees par qPCR et Western Blot. Des etudes in vivo chez des souris males C57Bl6 (3 mois ou 22 mois) ont ete menees en complement des etudes in vitro. Les souris ont ete soumises a 7 semaines d’entrainement volontaire sur roue d’activite ou a un exercice force « stressant » de course sur tapis roulant. Resultats et Analyse statistique Le traitement par l’α-LA des myotubes C2C12 affecte significativement l’expression de genes cibles de PPARβ/Δ (ex. PDK4, CPT1a, catalase, Prkag3, Myh7). En revanche, l’α-LA ne presente pas d’activite agoniste de PPARβ/Δ. Les quantites d’ARNm et de proteine PPARp/A sont significativement plus elevees (x2) dans les cellules traitees a l’α-LA (300 μM). La proteine PPARβ/Δ exprimee en reponse a l’α-LA est fonctionnelle puisqu’un co-traitement a l’α-LA potentialise les effets geniques du GW0742. Comme le traitement par l’α-LA, l’inhibition de la voie c-Jun N-terminal kinase (JNK) par le SP-600125 (30 μM), augmente significativement (x2) les concentrations d’ARNm et de proteine PPARβ/Δ et module le niveau d’expression de ses genes cibles. Le traitement par l’α-LA diminue la forme phosphorylee de JNK et de c-Jun dans les C2C12. Dans le vastus lateralis de souris, l’expression de PPARβ/Δ est augmentee (x2) par l’entrainement volontaire, et diminuee en reponse a des situations physiologiques stressantes (vieillissement, exercice force). Conclusion L’entrainement volontaire chez la souris et le traitement des myotubes par l’α-LA augmente l’expression de PPARβ/Δ et ses gene-cibles. Ces effets apparaissent medies par une modulation du niveau d’activite de la voie JNK. Il reste a elucider si les effets de l’α-LA « miment » reellement les effets de l’entrainement ou s’ils contrebalancent les consequences de l’inactivite physique. Si tel est le cas, l’α-LA pourrait etre envisage comme un traitement preventif des consequences metaboliques de la sedentarite lorsque l’activite physique est impossible.