异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用
2017
目的
研究异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。
方法
采用异槲皮苷(0、40、80、160、320 μmol·L -1 )作用于HepG2细胞,MTT法检测异槲皮苷对HepG2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160 μmol·L -1 )作用HepG2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用HepG2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。
结果
MTT检测发现异槲皮苷对HepG2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用HepG2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G 1 期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80 μmol·L -1 )作用HepG2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低( P
结论
异槲皮苷有诱导HepG2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。
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