重组抗HER2 ScFv／tbid基因的表达及其对乳腺癌SKBr-3细胞的促凋亡作用

目的：观察构建的重组抗HER2 ScFv／tbid基因在SKBr-3细胞中的表达及其对转染的SKBr-3细胞的作用．方法：用限制性内切酶双酶切已构建的pcDNA-bid质粒，获得带有PE转膜结构域和tbid的重组基因，将所获基因插入到真核表达载体pCMV单链抗体基因ScFv23e的下游，转染SKBr-3细胞．间接免疫荧光法检测目的蛋白的表达，MTT法检测目的基因转染后细胞的增殖情况．结果：转染SKBr-3细胞后，检测出目的蛋白的表达．MTT实验发现细胞的增殖被明显抑制．间接免疫荧光双标记染色检测tBid的表达，并可观察到Cytc在细胞质中存在，SKBr-3细胞出现凋亡．结论：重组抗HER2 ScFv／tBid分子可以在转染的SKBr-3细胞中表达，并且可抑制转染细胞的生长，诱导细胞发生凋亡．