Etude des relations structure-dynamique-fonction au sein de l'acétylcholinestérase

L'acetylcholinesterase est une enzyme tres rapide, essentielle a la neurotransmission cholinergique. Elle est la cible de toutes les molecules actuellement utilisees dans le traitement de la maladie d'Alzheimer, et les progres a venir dans la modulation de son activite reclament une connaissance plus fine de sa structure et de sa dynamique. Dans cette these, nous decrivons trois approches experimentales ayant permis d'obtenir des informations structurales sur la dynamique de l'acetylcholinesterase. Nous rapportons, dans un premier temps, la structure de cette enzyme en complexe avec un putatif me��dicament anti-Alzheimer de seconde generation. Nous decrivons, par ailleurs, une approche de mise a l'equilibre reactionnel de complexes enzyme/substrat cristallins, grâce a laquelle. Le trafic des substrats au sein de l'acetylcholinesterase a pu etre suivi structuralement. Nous presentons, enfin, le developpement d'une strategie nouvelle en cristallographie cinetique des proteines, basee sur l'utilisation d'un precurseur photosensible du produit de reaction enzymatique, sa photolyse in-crystallo par le biais d'un laser, et l'application subsequente de profils de temperature adequats afin de permettre la survenue des mouvements moleculaires necessaires a l'expulsion des produits de photolyse. Prises conjointement, les differents resultats de cette these permettent une description detaillee du trafic des substrats et produits au sein de l'acetylcholinesterase, et fournissent un apercu structural de son paysage conformationnel.