Hyperthermie magnétique et détection électrochimique pour le relargage et la détection de microARN sans amplification de type PCR

La reaction en chaine par polymerase (PCR), methode de reference pour la mesure d'acides nucleiques ADN en biologie clinique, est basee sur une amplification chimique du nombre des copies d'une ou plusieurs sequences ADN pour pouvoir les amener a un seuil detectable. Bien que robuste, la methodologie PCR presente l'inconvenient majeur d'etre inadaptee pour la biologie d'urgence car le rendu d'un resultat (preparation, extraction, amplification et quantification) peut atteindre entre 4 et 6 heures. L'autre inconvenient, dans le cas des sequences ARN, est une etape supplementaire de transcription inverse (RT) (ARN en ADN), etape delicate rallongeant encore le temps du protocole. Enfin, la technologie PCR est tres consommatrice en energie a cause des systemes de regulation necessaires pour les cycles de temperatures jusqu'a 95 °C. Cet article presente la preuve de concept d'un nouveau procede couplant l'hyperthermie magnetique et la detection electrochimique (HDE) en microfluidique pour le relargage et la detection directe en moins de 3 h, a un seuil de detection de 10-18 M, d'un microARN synthetique et specifique des lesions du foie (miR 122). L'objectif est d'aboutir a une sorte de biopsie microfluidique liquide rapide (1 h 30) pour le diagnostic d'urgence. Mots-cles Microfluidique, electrochimie, hyperthermie, nanoparticules magnetiques, acides nucleiques, PCR.