钙调素拮抗剂O-（4-乙氧基）-丁基-小檗胺对乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR的耐药逆转作用

目的 研究钙调素拮抗剂O-4-乙氧基-丁基-小檗胺（EBB）对乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR的耐药逆转作用.方法 采用四唑盐（MTY）比色法测定药物敏感性,分析联合应用低剂量EBB（≤IC20）时阿霉素（ADR）对MCF-7/ADR细胞的半数抑制浓度（IC50）值及其增敏倍数;应用流式细胞术测定EBB对细胞周期的影响,同时观察细胞内药物浓度的积累;采用逆转录-多聚酶链反应检测EBB对多药耐药基因-1（mdr1）及拓扑异构酶Ⅱb（topⅡb）mRNA表达水平的影响.结果 EBB对MCF-7/ADR的多药耐药具有明显逆转作用,3、7.5 μmol/L浓度的EBB可以明显提高MCF-7/ADR对ADR的敏感性,平均增敏倍数分别为50.40、89.80倍,逆转强度明显高于阳性逆转剂维拉帕米（VPL）的14.88倍（P=0.0097）.6 μmol/L的EBB处理2 h后,细胞内积累的P糖蛋白底物罗丹明123（Rh123）荧光强度峰值发生明显右移;同时EBB可明显增强ADR对MCF-7/ADR细胞在G2/M期的阻滞作用.6和12μmol/L的EBB处理MCF-7/ADR细胞48h后,mdr 1的mRNA表达水平有一定的降低趋势,但无统计学差异;top Ⅱb基因表达差异亦无显著性.结论 EBB对MCF-7/ADR细胞具有较强的逆转多药耐药作用,其可能的逆转机制在于增强ADR对耐药细胞在G2/M期的阻滞以及抑制P糖蛋白外排泵作用.