Sequenciamento de DNA Mitocondrial para avaliacao de diferencas geneticas em ovinos (Ovis aries) Mitochondrial DNA sequencing for assessment of genetic differences in sheep (Ovis aries)

O sequenciamento de Sanger, ou identificacao das bases moleculares do DNA por terminacao da cadeia, e um dos metodos amplamente utilizados para estudos moleculares. O uso da regiao citocromo b do DNA mitocondrial como marcador molecular se justifica pela presenca de regioes conservadas e variaveis que podem ser sequenciadas e utilizadas em analises filogeneticas em diferentes niveis taxonomicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a variacao do DNA mitocondrial por meio de sequenciamento de Sanger. Para tanto, amostras de tecido sanguineo de ovinos do grupamento genetico Pantaneiro (n=14), Bergamacia (n=4), Dorper (n=5) e Ile de France (n=5) foram utilizadas para extracao de DNA. Logo em seguida as amostras foram submetidas a procedimentos de amplificacao, purificacao e sequenciamento. As analises estatisticas foram realizadas nos programas BioEdit 7.3.1.0 e MEGA 5.10. A utilizacao de primers internos e externos possibilitou o sequenciamento de 86% da regiao do citocromo b, o que indicou menor perda de nucleotideos que acontece na reacao de sequenciamento com apenas um par de primers. Os calculos de diversidade media da regiao sequenciada permitiram observar baixa variacao genetica na populacao, evidenciando a natureza conservada do DNA herdado maternalmente. O sequenciamento parcial da regiao do citocromo b foi capaz de mostrar a variacao do DNA mitocondrial em ovinos de 4 racas diferentes e proporcionou gerar dados para a realizacao de estudos futuros de origem e evolucao dos animais.