微RNA-490-5p抑制人肝内胆管细胞癌RBE细胞的侵袭和迁移

2017 
目的: 研究微RNA-490-5p (microRNA-490-5p,miR-490-5p)在人肝内胆管细胞癌组织中的表达情况,并探讨其对肝内胆管癌RBE细胞侵袭和迁移能力的影响及可能的分子机制。 方法: 采用实时荧光定量PCR法检测miR-490-5p在5对肝内胆管细胞癌组织及其癌旁正常组织中的表达水平。利用脂质体瞬时转染法将miR-490-5p模拟物及其阴性对照转入人肝内胆管细胞癌RBE细胞中。随后,采用划痕愈合实验以及Transwell小室迁移实验检测RBE细胞迁移能力的变化,Transwell小室侵袭实验检测RBE细胞侵袭能力的变化;最后,通过CCK-8法、平板克隆形成实验和FCM法检测RBE细胞增殖及凋亡的变化。应用在线miRNA靶基因预测软件预测miR-490-5p的靶基因,并采用蛋白印迹法对预测的靶基因进行验证。 结果: miR-490-5p在人肝内胆管细胞癌组织中明显下调( P P 值均> 0.05);划痕愈合实验以及Transwell小室迁移实验检测结果显示,RBE细胞的迁移能力被明显抑制( P 值均 P 值 c-Fos )可能是miR-490-5p的潜在靶基因;蛋白质印迹法证实,miR-490-5p模拟物转染组细胞中c-Fos蛋白的表达水平明显下调( P 结论: miR-490-5p在人肝内胆管细胞癌组织中低表达,而且其可能通过下调c-Fos的表达来调控人肝内胆管细胞癌RBE细胞的迁移和侵袭。
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