Mapeamento físico de snDNA U2 em espécies da família Cichlidae

O processo de splicing do RNA mensageiro e realizado pelo spliceossomo em um dos maiores e mais complexos mecanimos moleculares da celula. O spliceossomo consiste em cinco RNAs nucleares (snRNAs) – U1, U2 U4,U5 e U6 que, unidos com varios fatores proteicos, formam uma  ribonucleoproteina nuclear (snRNPs). Os ciclideos sao um dos maiores e mais diversificados grupos de peixes, sendo importantes modelos de evolucao biologica, alem de serem apreciados na aquariofilia e aquicultura. Apesar disso, ainda sao poucos os trabalhos citogeneticos, com somente 154 especies cariotipadas ate o momento e este numero se restringe ainda mais quando se trata de analises com sequencias de DNAs repetitivos, principalmente em ciclideos neotropicais. Sendo assim, o presente estudo tem como objetivo a localizacao cromossomica do gene snRNA U2 em diferentes especies da familia Cichlidae. Foi realizada a extracao de DNA de Cichlasoma e utilizada como molde para amplificacao do gene U2, com os primers U2F (59-ATC GCT TCT CGG CCT TAT G–39) e U2R (59-TCC CGG CGG TAC TGC AAT A-39). Essa PCR foi marcada com Cy3dUTP. O fragmento da PCR obtido no presente trabalho foi de, aproximadamente, 200 pb o que parece ser semelhante ao encontrado para o mesmo gene no genoma humano, que mostra uma regiao codificante de 188 pb. A hibridacao fluorescente in situ (FISH) foi realizada em seis especies de ciclideos neotropicais. Cichlasoma portalegrense , Gymnogeophagus gymnogenys, Crenicichla lepdota, Crenicichla maculata  e Crenicichla niederleinii  apresentaram um par portador do sitio de DNAsn U2, enquanto Crenicichla britski apresentou dois pares. Os estudos com a sequencia de DNAsn U2 em peixes ainda sao muito restritos, mas em sua maioria evidenciam essa sequencia em um unico par cromossomico contudo, estudos recentes demonstram uma variabilidade maior em relacao ao mapeamento fisico desta sequencia. Em ciclideos existem analises de DNAsn U1 para 12 especies, todas com um unico sitio portador da sequencia entretanto, para DNAsn U2 os dados aqui apresentados sao os primeiro neste grupo de peixes e, apesar de preliminares, ja indicam que analises desta e outras sequencias de DNA repetitivo podem contribuir para um maior entendimento da organizacao genomica da familia Cichlidae.