Protocole de stockage de tissus thyroïdiens provenant de goitres pour analyse transcryptomique

But de la presentation Le goitre reste un important probleme de sante publique dans certaines regions de la planete, en particulier en Amerique du Sud et en Afrique. Cette etude discute l’experience de l’elaboration d’un protocole de collecte et de stockage de fragments de tissu thyroidien ayant un diagnostic de goitre, pour une etude transcryptomique dans une population ou le goitre est endemique. Materiel et methodes On a selectionne des patients de sexe feminin qui avaient fait un examen de cytologie par PAAF (ponction aspiration a l’aiguille fine) ayant pour resultat la classe II dans la classification de Bethesda, une echographie de la region cervicale compatible avec un goitre et finalement une thyroidectomie dont le diagnostic histopathologique etait de goitre colloide. Immediatement apres l’exerese du goitre, on a retire de chaque lobe, de l’isthme et du lobe pyramidal, des fragments de tissu thyroidien mesurant environ 1 cm 2 . Ces echantillons ont ete places dans des cryotubes de 2 mL dument identifies, contenant un conservant d’ARN, qui ont ete maintenus dans de la glace carbonique a –4 °C, puis stockes a –80 °C. Une partie des echantillons a ete maceree dans du nitrogene liquide et soumis a extraction de l’ARN total et a purification de l’ARN messager avec des kits specifiques, puis a confirmation sur gel d’agarose. Resultats On a recueilli des fragments de tissu de 17 patientes dont deux ont ete exclues apres l’histopathologie car il s’agissait d’un carcinome papillifere pour l’une et d’une thyroidite de Hashimoto pour l’autre. Les 15 echantillons soumis a extraction de l’ARN total et purification de l’ARN messager ont pu etre visualises sur gel d’agarose avec une bande compatible avec l’ARN. Conclusion Les resultats obtenus montrent que la methodologie utilisee est satisfaisante pour monter une histotheque de tissus thyroidiens, a partir d’echantillons retires immediatement apres la thyroidectomie, permettant des etudes transcryptomiques futures.