Valoración de la técnica de PCR-Southern blot para el análisis de la viremia en pacientes con hepatitis aguda A

Resumen El analisis de la viremia en la infeccion por el virus de la hepatitis A (VHA) mediante los metodos convencionales es poco utilizado debido a que la determinacion viral se realiza habitualmente en heces y a que las tecnicas empleadas son laboriosas y tienen baja rentabilidad diagnostica. Los objetivos de este trabajo son el desarrollo de un metodo de amplificacion genica y Southern blot para la deteccion de ARNVHA en el suero de los pacientes con infeccion aguda y relacionar la presencia de ARN-VHA con la deteccion de anticuerpos anti-VHA de tipo IgM y los valores de la alanina aminotransferasa (ALT). El ARN-VHA se ha estudiado en 26 muestras de suero de 21 pacientes con hepatitis aguda A, en 11 muestras de pacientes con hepatitis aguda B y en 15 con hepatitis aguda no A, no E. El ARN-VHA se detecto en 10 (38%) de las 26 muestras de suero de pacientes con hepatitis aguda A. En cinco muestras fue positivo por la tecnica de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR) simple y en 10 mediante la tecnica de PCR-Southern blot. El ARN-VHA fue positivo en el 100% de las muestras de suero obtenidas en la primera semana de la sintomatologia clinica, en el 50% de las muestras de la segunda semana y no se detecto en ninguna de las muestras obtenidas posteriormente. No se detecto ARN-VHA en ninguno de los 11 casos de hepatitis aguda B ni de los 15 de hepatitis aguda no A, no E. No se observo una relacion significativa entre la deteccion de ARN-VHA y el grado de positividad de los anticuerpos anti-VHA de tipo IgM, pero si en cambio con el aumento de la ALT. En conclusion, la presencia de ARN-VHA en la hepatitis aguda A es frecuente, pero su deteccion es transitoria durante las primeras 2 semanas del inicio de la sintomatologia clinica y requiere de una tecnica de amplificacion genica y Southern blot.