Élaboration d'un matériau hybride à base de silice et de polyoxyéthylène : support de synthèse d'oligonucléotides utilisable dans le systèm du diagnostic

Dans le domaine du diagnostic medical, la detection et la quantification d’ADN dans les milieux biologiques complexes font l’objet de nombreux sujets de recherche. Les tests reposent sur la reconnaissance de la cible ADN au moyen d’une sonde nucleique immobilisee sur un support solide. Ces tests souffrent d’un manque de sensibilite du en partie a la trop faible surface specifique des supports utilises, et a la difficulte de fonctionnaliser ces surfaces par les sondes de capture qui permettent l’immobilisation de l’ADN cible par reaction d’hybridation. Afin d’ameliorer cette phase de capture du test, nous avons propose d’elaborer un support de tres grande surface specifique, et d’augmenter ainsi le nombre de sondes greffees. La strategie mise en place a ete l’elaboration d’un support unique de grande surface specifique utilise a la fois pour la synthese oligonucleotidique et pour le developpement des tests diagnostiques. Pour repondre a cet objectif, nous avons elabore un materiau forme d’agregats de taille controlee, constitue de nanoparticules de silice colloidale aminee reliees entre elles par des polymeres de type polyoxyethylene. Le processus d’agregation des colloides a ete effectue de maniere controlee, en utilisant des polyoxyethylenes fonctionnalises a chaque extremite par des groupements isocyanates pour etablir des ponts covalents entre les colloides. Le materiau ainsi elabore a ete utilise comme support de synthese automatisee d’oligonucleotide. L’evaluation des conjugues (agregat- oligonucleotide) lors de test d’hybridation ADN sur biopuces a ete effectuee. Une sensibilite de 6 pM en ADN cible a ete obtenue sur le modele de test etudie, par detection en chimiluminescence de la reaction enzymatique revelant l’hybridation