Estudo da homeostase de zinco no fungo patogênico Histoplasma capsulatum var. capsulatum: Abordagens proteômica e funcional

Histoplasma capsulatum var. capsulatum e um fungo patogenico causador da doenca sistemica conhecida como histoplasmose. Essa micose apresenta endemicidade nas regioes do rio Mississipi e Ohio nos Estados Unidos, encontrado tambem em varios paises da America do Sul. No Brasil, o numero de pessoas infectadas por este fungo vem crescendo nos ultimos anos, principalmente em pessoas imunocomprometidas. H. capsulatum e um micro-organismo termodimorfico, encontrado em dois morfotipos: micelio a 25oC e levedura a 37oC. Durante o processo de infeccao o micro-organismo patogenico necessita obter nutrientes para que cresca e se desenvolva dentro do tecido do hospedeiro. Dentre os nutrientes essenciais, o zinco e um ion metal essencial, utilizado na manutencao de inumeras vias metabolicas. O zinco e utilizado como cofator catalitico e ou estrutural de inumeras metaloproteinas. A captacao de zinco e caracterizada como um fator de virulencia em H. capsulatum. Com o objetivo de estudar os mecanismos moleculares da homeostase de zinco em H. capsulatum, foi realizada primeiramente a analise in silico das proteinas relacionadas a homeostase de zinco. Foram encontrados o fator de transcricao ZafA que atua na regulacao de genes em resposta ao nivel de zinco no meio e o fator de transcricao PacC que atua na regulacao de genes em resposta ao pH, adicionalmente foram encontrados transportadores de membrana ZrfA e ZrfC, alem dos transportadores vacuolares ZrfF, ZrcA e ZrcC. A analise do perfil transcricional destes genes foi mensurada por RT-PCR em macrofagos infectados e in vitro. Durante a infeccao os genes ZafA e ZrfA foram induzidos, sugerindo que estes genes foram expressos a fim de suprir a celula fungica com zinco, devido a deficiencia do metal causada pela infeccao. In vitro, ZafA, ZrfC, ZrfF, ZrcA e ZrcC foram induzidos na condicao de privacao de zinco, comparado com a condicao controle. De acordo com os dados proteomicos do fungo em condicoes de privacao zinco, foi sugerido a inducao de proteinas relacionadas ao resgate, defesa e virulencia, relacionadas principalmente ao estresse oxidativo, alem de outras vias metabolicas como gliconeogenese. Estes dados sugerem que o fungo sofre um remodelamento metabolico em resposta ao estresse oxidativo causado pela privacao de zinco.