1,25 （OH）_2D_3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响

目的观察1,25-二羟维生素D_3〔1,25（OH）_2D_3〕对人系膜细胞（HMC）增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25（OH）_2D_3对HMC增殖调控中的作用。方法体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组：正常对照组（N组）、1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L,VD组）、PI3K抑制剂干预组（LY294002 2μg/ml,LY组）,LY294002（2μg/ml）联合1,25（OH）_2D_3组（10-8mol/L）组（LY＋VD组）,干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果各实验组吸光度值（A值）比较,差异有统计学意义（F=281.641,P〈0.01）,其中VD组、LY组和LY＋VD组A值均低于N组,LY＋VD组A值均分别低于VD组和LY组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。各实验组G_2/M期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组G_1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组G_1期均高于N组,S期和PI均低于N组,LY＋VD组G1期均高于VD组,S期和PI均低于VD组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。各实验组Akt/β-actin、mTOR/β-actin灰度值比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;其中VD组、LY组和LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于N组,LY＋VD组p-Akt/Akt、p-nmTOR/mTOR灰度值均低于VD组和LY组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论1,25-（OH）_2D_3可通过PI3K/Akt信号通路抑制体外培养HMC的增殖。