小鼠脑皮质p-Akt、p53在缺血再灌后处理脑保护机制中的作用

目的观察p-Akt、p53在小鼠局灶性脑缺血再灌注（I／R）及缺血后处理（IPO）后在脑皮质区的表达规律，探讨p-Akt、p53与IPO保护作用的关系。方法采用线栓法制备大脑中动脉栓塞的局灶性脑缺血模型，将272只小鼠随机分为假手术（Sham）组、缺血再灌（I／R）组、PI-3K／Akt抑制剂LY294002（LY）组和缺血后处理（IPO）组。I／R组、LY组与IPO组均实施缺血90min之后再灌注，IPO组在持续再灌前采取再灌15s、缺血15s、再灌15s的循环，共3个循环。于再灌后30rain、1h、3h、6h、24h、48h分别取材，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定脑梗死体积；免疫组织化学法观察p-Akt，p53蛋白的表达及分布；免疫印迹法检测皮质区p-Akt和p53蛋白表达量。结果Sham组、I／R组和IPO组的非缺血脑半球皮质p-Akt有微量表达。与Sham组相比，I／R组再灌后30min缺血区皮质p-Akt增加，1h达高峰，6h逐渐降低，24h降至Sham组水平并持续；p53再灌后6h增加，24h达高峰，48h回落。各相应时间点IPO组较I／R组p-Akt增高（P〈0．05），p53降低（P〈0．05）。LY组p-Akt低于I／R组（P〈O．05），p53高于I／R组（P〈0．05）。顶叶脑组织的免疫印迹分析结果与免疫组织化学结果规律一致。结论缺血后处理对缺血再灌注性脑损伤有保护作用，其机制与降低p53表达及增强p-Akt表达有关。