红花注射液对肝星状细胞HSC—T6增殖、凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的研究红花注射液对肝星状细胞（hepatic steuate cell，HSC）HSC—T6增殖、凋亡及凋亡相关基因bcl-2及bax mRNA表达的影响。方法体外培养HSC株，用不同质量浓度的红花注射液处理HSC—T6，采用MTT法检测细胞增殖；采用5、10、20mg／mL红花注射液干预细胞24h，流式细胞仪检测细胞周期；倒置显微镜下观察细胞凋亡形态学改变；并用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA Ladder凋亡梯度；Annexin V-FITC／PI双染色流式细胞仪分析凋亡率；Realtime-RTPCR检测凋亡相关基因bcl-2、baxmRNA的表达水平。结果红花注射液对HSC增殖有明显的抑制作用，且作用呈剂量和时间依赖性；红花注射液（10、20mg／mL）作用24h流式细胞术测出G0／G1期细胞所占比例增多，与对照组比较差异显著（P〈0．05、0．01）；药物干预后细胞表现不同程度的凋亡，琼脂糖电泳可见DNA出现断裂、PI／Annexin V双染流式细胞仪分析对照组凋亡率为（0．73±0．33）％，红花注射液在5、10、20mg／mL凋亡率分别为（2．04±0．58）％、（9．46±1．29）％、（16．55±1．27）％，差异显著（P〈0．01）；Realtime-RT—PCR结果显示红花下调抗凋亡基因bcl-2的mRNA表达，同时上调HSC—T6的促凋亡基因bax的mRNA表达。结论红花注射液能抑制HSC增殖及增殖周期，促进活化的HSC凋亡，其机制可能是调控bcl-2／bax mRNA的表达。