Approche métabolomique in vitro du stress oxydatif induit par les acides aristolochiques sur la cellule endothéliale

Introduction La nephropathie aux acides aristolochiques (AA) se caracterise par une atrophie tubulaire et une fibrose interstitielle severes mais aussi par une rarefaction des capillaires peritubulaires. L’hypoxie tissulaire induite pourrait contribuer a la progression rapide des lesions tubulo-interstitielles. Description Vu la production d’especes reactives de l’oxygene rapportee dans une lignee de cellules endotheliales humaines (EAhy926) exposees aux AA [Toxicol In Vitro 2020 ;65 :104811], le but de ce travail est d’investiguer in vitro les changements metabolomiques AA-induits et les effets cytoprotecteurs eventuels du nebivolol (NEB), un β-bloquant presentant des proprietes antioxydantes [J Hum Hypertens 2017 ; 31 :376]. Methodes Les cellules EAhy926 sont incubees en presence ou non de AA (50 μM ou 100 μM) et les effets d’une preincubation au NEB (10 nM) sont evalues par le test de viabilite a la resazurine. La production d’H2O2 est mesuree par cytometre en flux. Pour chaque condition experimentale, les profils metabolomiques des extraits intracellulaires et des surnageants sont analyses par la spectroscopie 1H-RMN. Resultats Apres 24 h, les AA produisent des effets cytotoxiques marques dose-dependants et une production d’H2O2 nette, effets attenues par le NEB. Apres 48 h d’exposition aux AA, les principaux changements metabolomiques sont une diminution significative de l’arginine, du glutamate, de la glutamine et du glutathion ainsi qu’une augmentation significative de l’aspartate, de la glycerolphosphocholine et de l’UDP-N-acetylglucosamine. Le NEB inhibe significativement les changements en glutathion et glycerophosphocholine. Dans les surnageants des cellules intoxiquees, on observe une augmentation en glucose ainsi qu’une reduction en lactate et en glutamate, cette derniere etant significativement inhibee par le NEB. Conclusion Cette etude confirme la toxicite des AA vis-a-vis de la cellule endotheliale et la cytoprotection partielle du NEB. L’analyse metabolomique corrobore l’implication du stress oxydatif dans les lesions endotheliales. Le NEB semble etre une molecule interessante a explorer dans la prevention de l’hypoxie renale d’origine toxique.