Mycoplasma spp em amostras biológicas de animais de laboratório e cultivo celular: detecção por cultivo e reação em cadeia da polimerase (PCR)

Mycoplasma pulmonis e um agente infeccioso frequentemente encontrado em animais de laboratorio, coloniza o trato respiratorio e genital e ouvido medio, e pode influenciar resultados experimentais. Geralmente, a infeccao e subclinica, embora manifestacoes clinicas sao encontradas. Algumas especies causam infeccao uterina e atravessam barreiras placentarias, sendo fundamental a analise das amostras de placenta validando a eficiencia da histerectomia na eliminacao de contaminacoes em animais de laboratorio. Linhagens celulares tambem podem estar contaminadas por especies de Mycoplasma e Acholeplasma. Sua deteccao pode ser feita por cultivo, metodos sorologicos e tecnicas moleculares. Foram analisadas 24 amostras: pulmao(n=2) e lavado traqueal de ratos(n=18), placentas de camundongos (n=4) e 07 linhagens celulares. As amostras foram cultivadas em caldo e agar PPLO enriquecido. Para a confirmacao de crescimento de Mycoplasma spp realizou-se uma PCR grupo-especifico com primers direcionados para regioes conservadas do gene 16S do RNAr da familia Mollicutes. Para a determinacao da especie, as amostras positivas, foram testadas com primer especie-especifico que amplifica as especies de M. pulmonis, M.arthritidis, M.neurolyticum, M.arginini e M.urealyticum. Das amostras testadas, 20(83,33%) foram positivas no cultivo com caldo PPLO e em meio solido observou-se colonias com morfologia tipica de “ovo frito”. As amostras de placenta foram negativas no cultivo e PCR. Observou-se 18 amostras positivas (75%) com primer grupo-especifico e 13 (54,16%) para M. pulmonis com primer especie-especifico. Das linhagens celulares, 5(71,42%) foram positivas com primer grupo-especifico. A utilizacao deste primer e uma alternativa na deteccao de contaminacoes por especies de Mycoplasma em animais de laboratorio e culturas celulares.