Cocultures de cellules épithéliales et de fibroblastes issus de patients asthmatiques et BPCO, un modèle in vitro d’ACOS ?

Introduction Les specificites des patients atteints du syndrome de chevauchement asthme-bronchopneumopathie obstructive (BPCO) ou ACOS recemment inscrit dans les guidelines internationaux pose la question de son substratum immunobiologique. Nous avons emis l’hypothese que la coculture de cellules issues de patients asthmatiques et BPCO pourrait permettre d’identifier certains des mecanismes physiopathologiques impliques dans ce syndrome. Methodes Les cellules epitheliales bronchiques d’un patient asthmatique ont ete mises en coculture au cours de leur differentiation en interface air-liquide avec respectivement 3 fibroblastes bronchiques post-mitotiques (mitomycin C) issus de patients asthmatiques (2 moderes et 1 severe) et 3 issus de patients BPCO Gold 2 (groupes A et B respectivement). Une condition sans fibroblaste etait realisee comme controle. Nous avons mesure la resistance electrique transepitheliale de facon hebdomadaire. Apres 5 semaines, nous avons extrait l’ARN des cellules epitheliales pour analyse de l’expression genique par microarray (BeadChips™ HT-12 d’Illumina). Resultats Les resistances transepitheliales ont augmente de facon significative au cours de la coculture ( p 2  et 1133 Ω/cm 2  en fin d’experience respectivement pour les conditions A et B (NS). Les coupes histologiques confirmaient la bonne differentiation epitheliale. L’analyse cluster identifiait clairement les 2 groupes avec une bonne proximite des 3 conditions intragroupe. Six cent quatre genes etaient significativement surexprimes (dont 144 de plus de 1,5 log2) et 707 sous-exprimes dans le groupe B (dont 19 de plus de 1,5 log2) comparees au groupe A. En particulier, on notait une modification d’expression de genes impliques dans le remodelage des voies aeriennes comme MMP9 (−3,1 log2, padj  =  0,03), ECM1 (−2,6 log2, padj  =  0,03) ou encore l’endothelin-1 (−1,6 log2, padj  Conclusion Les fibroblastes issus de patients asthmatiques ou BPCO affectent differemment l’expression genique des cellules epitheliales bronchiques de patient asthmatique. Des analyses complementaires pour confirmer ces resultats par qPCR et l’etude des consequences de ces modifications sur la reponse aux stimuli allergeniques et infectieux permettront de confronter ce modele aux donnees issues des patients atteints d’ACOS.