6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

目的：观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法：Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA（SLC15A1）的表达水平。结果：6-姜酚处理组Caco-2细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为（6.84±0.46）,（8.61±0.54）μmol/孔,高于正常对照组（P〈0.05）,后者分别为（5.62±0.20）、（6.54±0.54）μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为（6.92±0.67）μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组（P〈0.05）;6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为（0.317±0.022）,高于空白对照组（0.220±0.019）（P〈0.01）;荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断。结论：6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。