抑制NF-κB活性对TNF-α联合IFN-γ诱导肾小管上皮细胞表达趋化因子的影响

目的 ：探讨抑制核转录因子-κB（nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB）活性对肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α联合干扰素（interferon,IFN）-γ诱导肾小管上皮细胞表达趋化因子的影响,及过氧化小体增殖剂激活型受体-γ（peroxisome proliferator activated receptor-gamma,PPAR-γ）激动剂15-脱氧-Δ（12,14）-前列腺素J2（15-deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2,15d-PGJ2）抑制趋化因子表达的机制。方法 ：将肾小管上皮细胞HK-2分为空白组、TNF-α联合IFN-γ刺激组（刺激组）、NF-κB的特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC）干预组及15d-PGJ2干预组。实时荧光定量PCR检测各组趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11 m RNA的相对表达量;ELISA检测各组上清液中趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的蛋白分泌量;Western blot检测空白组、刺激组及15d-PGJ2干预组中NF-κB信号通路相关蛋白p65、IκBα及其磷酸化蛋白p-p65、p-IκBα的表达量。结果 ：TNF-α联合IFN-γ刺激HK-2细胞后,CXCL9、CXCL10、CXCL11 m RNA表达量及蛋白分泌量显著增高（P〈0.05）;而经PDTC预处理后,趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的m RNA相对表达量分别下降了85.44%、45.94%、45.03%（P〈0.05）,蛋白分泌量分别下降了60.87%、47.59%及53.42%（P〈0.05）;15d-PGJ2预处理后,CXCL9、CXCL10、CXCL11的m RNA相对表达量分别下降了93.87%、92.40%、86.81%（P〈0.01）,蛋白分泌量分别下降了49.74%、67.13%、62.39%（P〈0.01）,且Western blot结果显示HK-2细胞中p65及IκBα蛋白的磷酸化水平与刺激组相比明显降低（P〈0.01）。结论 ：抑制NF-κB活性使HK-2细胞分泌趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11减少;15d-PGJ2通过抑制NF-κB信号通路的活化,下调趋化因子CXCL9、CXCL10、CXCL11的表达。