4株长牡蛎（Crassostrea gigas）致病性哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）鉴定及其毒力基因检测

为明确江苏连云港养殖长牡蛎大规模死亡病因，对分离自长牡蛎的4株病原菌开展了致病性、表型特征、分子特征等研究，结果表明4株病原菌均具致病性，4株病原菌ML1、ML2、ML3、ML4对长牡蛎的半数致死量LD5。分别为2．8×105^、1．1×105^、1．8×105^和1．6×105^CFU／mL；4株病原菌均为呈短杆状革兰氏阴性细菌，氧化酶阳性，还原硝酸盐，能利用甘露醇、纤维二糖，形态及理化特性结果表明4株分离菌与弧菌属的哈维氏弧菌亲缘关系最近；16SrRNA、gyrB、rpoA基因同源性检索及系统发育学分析结果表明4株分离与GenBank数据库中哈维氏弧菌的基因序列相似性最高且在系统发育树中聚为1个分支；根据4株分离菌的致病性、表型与分子特征，表明引起长牡蛎大规模死亡的病原为哈维氏弧菌。为进一步明确分离菌株毒力基因的携带情况，检测了分离鉴定的4株病原菌的9种毒力基因，结果表明，4株病原菌均可检测到luxR、toxR、vhhA和vhhB4种毒力基因，扩增片段大小分别为679bp、390bp、1324bp和216bp，其他5种毒力基因未检测到，且分离鉴定的4株病原哈维氏弧菌携带相同的毒力基因，这些毒力基因可作为检测致病性哈维氏弧菌的分子标记。