Métabolisme du glucose chez l'homme : développement de l'utilisation du glucose marqué au carbone 13 et de son analyse en spectrométrie de masse isotopique

Le metabolisme du glucose a ete etudie in vivo chez l'homme lors d'une charge orale de glucose ou d'amidon, en utilisant des traceurs stables du glucose (#1#3c et #2h glucose). Cette approche a necessite le developpement ou la mise au point de techniques specifiques: 1) analyse du #1#3c glucose et du co#2 expire par spectrometrie de masse isotopique; 2) calorimetrie indirecte permettant la determination de l'oxydation des differents substrats (glucides, lipides, protides); 3) methode totalement originale de couplage chromatographie en phase gazeuse spectrometrie de masse isotopique (cpg-smi), d'une sensibilite 100 a 1000 fois superieure a celle des couplages cpg-sm organiques classiques. Cette methodologie permet de mesurer en ligne, sur un echantillon de glucose de l'ordre du nanogramme et parfaitement purifie, un enrichissement de 0,001 atomes pour cent en exces par rapport a l'enrichissement naturel du glucose plasmatique. La validation de cette methode a ete realisee chez le rat a jeun en mesurant simultanement le debit de renouvellement du glucose par l'analyse de son enrichissement isotopique en cpg-sm organique avec du 6,6-#2h#2 glucose et en cpg-smi avec du 1-#1#3c glucose comme traceurs. Les parametres dynamiques du metabolisme glucidique au cours d'une charge orale en glucose ou en amidon: apparition du glucose dans le sang, production hepatique et utilisation (oxydation, stockage) ont ete mesures. L'apparition du glucose total dans le pool plasmatique a ete determinee a l'aide du 6,6-#2h#2 glucose et l'apparition du glucose exogene dans le sang et le co#2 expire a ete quantifiee a l'aide de glucose naturellement et/ou artificiellement enrichi en #1#3c. L'oxydation du glucose a ete determinee par calorimetrie indirecte. En conclusion, ces methodologies ouvrent de nouvelles perspectives de recherche et leurs applications dans les sciences de l'alimentation, dans la nutrition