乙型肝炎患者外周血CD

目的 观察急、慢性乙型肝炎（AHB、CHB）患者外周血CD+4CD25high调节性T细胞（Treg）的频率、表型和功能特点。方法 采集16例AHB急性发病期（发病后第1周）患者、72例CHB患者和32例健康人的外周血，检测Treg频率，并分析其表面CD45RO、CD45RA、HLA-DR、CD95和细胞内细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的表达水平。应用实时荧光定量RT-PCR检测CD+4CD+25、CD+4CD-25、CD+4和CD-4等细胞亚群和外周血单个核细胞（PBMC）的FoxP3 mRNA表达量。通过MACS免疫磁珠分选Treg，并应用[3H]掺入法检测Treg抑制抗-CD3抗体和HBV抗原刺激的PBMC增殖能力，并观察Treg对HBV抗原或抗-CD3抗体刺激自体PBMC分泌IFNγ的影响。结果 CD+4CD25highTreg高表达CD45RO、HLA-DR、CD95和细胞内CTLA-4，低表达CD45RA，并且较特异的高表达FoxP3mRNA。乙型肝炎病人外周血Treg频率与健康对照（3.50±0.72）％比较无统计学差异，但CHB组（3.90±1.44）％显著高于AHB组（3.10±0.87）％，P<0.05。Treg本身对于HBV抗原或抗-CD3抗体刺激没有明显的增殖反应和IFNγ分泌，但可抑制自体PBMC增殖和IFNγ分泌，其中对HBV抗原刺激引起的细胞反应抑制作用较强。结论 HBV感染者外周血Treg较特异地表达FoxP3分子，能抑制HBV抗原特异性细胞免疫反应，这对于深入阐明CHB发病机制具有重要意义。