Kahverengi Alabalıkda Genetik Yaklaşımlı Anaç Yönetimi; Türkiye Soy Gruplarının Multipleks PZR ile Belirlenmesi

Son 20 yil icerisinde genetik cesitliliðin cesitliliði korunarak devaminin nasil saðlanabelirlenmesi icin cok calisma yapilmistir ve caðina karar verilir. Bir kisim balik anac bircok belirtec kullanilmistir. MtDNA ile yapilan icerisinde ayrilir yada yeni bireyler anac adayi onceki calismalar gostermistir ki Alabaliklarda olarak tutulur. (Pleistocene doneminde buyuk oranda allopatrik Molekuler belirtec teknolojisi su urunolarak) Atlantik (AT), Tuna (DA), Akdeniz lerinde de hastaliktan, yetistiriciliðe, balikci(ME), Marmoratus (MA) ve Adriyatik (AD) liktan gidaya kadar cok farkli amac icin kullanim olmak uzere 5 ana evolusyon soyu bulunimkani bulmustur. Doðal stok yapilarinin maktadir (Bernatchez vd., 1992). analizi, canli turleri arasindaki genetiksel Fakat cesitli insan aktiviteleri sonucunda farkliliðin belirlenerek taksonomi veya bircok populasyonu karismistir. Yalniz soysistematik calismalar, kultur balikciliðinda islahguruplari deðil soy icerisinde de karismalar seleksiyon gibi uygulamalar, gen kaynaklarinin olmustur. Buda lokal populasyonlarin genetik karakterize edilmesi ve gida ve orijin tespitine yapisini bozmustur ve stoklar arasi genetik yonelik yeni yontemler ortaya koymustur. Ayrica varyasyonun azalmasina neden olmakla birlikte bir ortama sonradan sokulan turler gibi hibridizasyon gorulmektedir (Hansen, 2002; faaliyetlerin genetik farklilik uzerine etkisini Ciftci vd., 2002; Eroðlu vd., 2011a). belirlemeye yonelik calismalar yapilmaktadir. Ozellikle yetistiricilik faaliyetleri kapsaSu urunlerinde tur ve orijin tespitinde kullanilan minda, baliklar bir yerden baska bir yere protein tabanli klasik metotlar artik yerini tasinmakta ve hatta ulke disindan yumurta genomik DNA ve mtDNA uzerindeki getirilmektedir. Tam kontrollu olmayan ortambolgelerde; RT-PCR, RFLP, mikrosatellit, SNP larda baliklar doðaya kacabilmekte ya da kultur ve DNA baz dizilimi gibi molekuler tekniklere ortaminda uretimde kullanilmaktadir. Bu birakmaktadir. Bu yontemlerle taze, dondudurumlarda doðal populasyonlar ile yakin rulmus ve hatta protein denaturasyonu gercekozelliðe sahip bireyler arasinda hibridizasyon lesmis konserve, tuzlama, tutsuleme gibi isleme siklikla gorulebilmektedir. Dunyada ve sureclerine tabi tutulmus orneklerin hangi Ulkemizde son yillarda Kahverengi alabaliklarla orijinden olduðu rahatlikla tespit edilebilir. Su kultur calismalari yurutulmektedir. Ulkemizde urunlerinde genetik kaynaklarin kontrol altinda kulturu yapilan kahverengi alabaliklarin basinda tutulmasi ve korunmasi icin uygun genetik Karadeniz Alabaliði S. trutta labrax gelmektedir. belirteclerin kullanimi buyuk bir oneme sahiptir Deniz alabaliði tam olarak Karadeniz'de daðilimi (Eroðlu vd., 2011b).bilinmemekle birlikte Karadeniz'e dokulen bircok akarsuda bu altturun bulunduðu Materyal-Metotdusunulmektedir. Bununla birlikte lokal izole Bu calismada; Firat Nehri, Uzun Gol, populasyonlarin kalmis olmasi ihtimali goz ardi Seyhan Nehri, Ceyhan Nehri, Aras Nehri edilmemelidir. kollarindan ve bir yetistiricilik tesislerinden Anac yonetimi planlanirken elde tutulan (Trabzon) orneklemeler yapilmistir. Baliðin anaclarin genetik yapisinin bilinmesi bizlere kuyruk yuzgecinden 2-3 cm'lik doku alinarak orijini ve genetik varyasyonu gibi bazi baliða zarar verilmeden uygulanan ornekleme ozelliklerinin bilinmesini saðlar. Genetik analizmetodu kullanilmistir. Alinan doku % 98'lk lersonucunda elde edilen temel ciktilar ile ancak etanol icerisinde DNA elde edilene kadar saf bir hat elde edilebilir ve bu hattin genetik saklanmistir.Toplam DNA ticari kitler (QIAamp DNA (Polimerize Zincir Reaksiyonu) karisimiyla mini kit ile QIAcube DNA ekstraksiyon yurutulmus ve sirasiyla;1 µl (10 pm) forward cihazinda) kullanilarak izole edilmistir. DNA primerler (16C,41T,128A,212C,278C) ve 1µl (10 orneklerinin konsantrasyonu ve safliðinin pm) reverse primer (Common R), 10µl PZR tahmini UV/visible spektrofotometre (BIO-RAD, Master Mix 2x (QIAGEN) ve 6,5µl ddH O The Smart Spec Plus) kullanilarak, 260 ve 280 nm karisimindan olusan solusyon hazirlanmis ve dalga boyunda optik yoðunluðunun okunmasiyla PZR tuplerine daðitilmistir. Olusturulan farkli yapilmistir. karisimlar; 95oC de 5dk ilk denaturasyon, 95oC de 30sn, 54oC de 90sn, 72oC de 30 sn olacak sekilde Multipleks-PZR 28 kez dongu ve son olarak 60oC de 30dk Kahverengi Alabaliktan kuyruk dokubekleterek gerceklestirilmistir. PZR arttirilsundan elde edilen toplam DNA iceresinden masinin sonucu 5µl urun 1xTBE tampon sistemi pro mitokondriyal DNA'nin tRNA -Dloop bolgesi ve %1,5'lik agaroz jelde yurutulmus, etidyum Kahverengi Alabaliklarin 5 soy grubuna ait olan bromidle boyanarak UV illuminatorle goruntuspesifik primer setleri (ileri veya geri yonlu) lenmis ve kontrol edilmistir(Şekil1). Jel gorunkullanilarak(Tablo 1) Thermal Cycler (BIOtuleri jel dokumantasyon sistemi (Biostep, RAD) yardimiyla coðaltilmistir. PZR islemi, her Darkhood DH 30/32) ve termal yazici (Mitsibushi bir ornek DNA'si 1µl ile birlikte 20 µl'lik PZR PS1D) kullanilarak kaydedilmistir.Tablo1: Primer isimleri, soy ve sekans bolgeleri