Anomalies du développement embryonnaire : apport au diagnostic du syndrome de Rubinstein-Taybi et recherche d'un gène impliqué dans une nouvelle forme de chrondrodrysplasie liée à l'X

Notre travail s'inscrit dans l'etude des maladies polymalformatives d'origine genetique. Nous avons dans ce cadre developpe deux axes de recherche : - dans le syndrome de Rubinstein-Taybi, nous avons mis en place, pour l'analyse du gene CREBBP, une technique de recherche des rearrangements, la QMF-PCR : nous avons identifie 17 deletions et 1 duplication sur un total de 83 patients, soit un taux de 20 % d'anomalies de dosage genique. Cette technique, hautement resolutive, est aujourd'hui transferee pour le diagnostic hospitalier de cette maladie. Grâce au sequencage des points de cassure, nous avons montre la predominance du mecanisme NHEJ dans l'apparition des deletions. - nous avons egalement travaille sur une famille avec une chondrodysplasie liee a l'X, afin d'identifier le gene implique. Le sequencage du gene HDAC6 a mis en evidence une variation dans sa region 3' non traduite. Une approche in silico a etabli que cette mutation affecte le site de reconnaissance du miR-433, qui intervient dans la regulation post-transcriptionnelle. Des tests fonctionnels ont montre que la mutation suffit a abroger totalement l'action regulatrice du miRNA, entrainant la surexpression de la proteine HDAC6. Nous avons montre qe le miR-433 destabilise l'ARNm et provoque sa degradation. L'analyse par Western Blot a confirme la surexpression d'HDAC6 dans le thymus d'un foetus mâle atteint, s'accompagnant de la diminution de la quantite de tubuline acetylee, qui est une des cibles d'HDAC6. Notre etude montre que cette mutation d'HDAC6 est tres vraisemblablement la cause de cette nouvelle forme de chondrodysplasie.