血小板衍生生长因子受体-β信号促进突变型p53介导MDA-MB-231细胞阿霉素耐药

目的 探讨血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-beta, PDGFR-β)信号与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞阿霉素耐药的关系及机制。 方法 采用流式细胞术、MTS法检测PDGF-DD(PDGFR-β特异性配体)对阿霉素所致的细胞G 2 期阻滞、细胞凋亡及死亡情况的影响；qPCR和Western blot检测突变型 p53、cdk1、PDGFR-β、p21、bax、hsp90 及 TopBP1 表达水平，以研究PDGF-DD、Wortmannin(PI3K抑制剂)对突变型 p53 及其功能的影响；利用siRNA干扰技术、qPCR探讨突变型 p53 、PDGF-DD和耐药相关基因表达的关系。 结果 PDGF-DD明显提高阿霉素条件下细胞存活率、降低细胞凋亡率、一定程度改善细胞G 2 期阻滞，显著提高突变型p53蛋白水平并改变其下游基因 cdk1、PDGFR-β、p21、bax 表达，但突变型 p53 mRNA变化差异不具统计学意义( P >0.05)。PDGF-DD显著上调 hsp90 (突变型p53蛋白稳定因子)和TopBP1(突变型p53功能促进蛋白)mRNA和蛋白水平，Wortmannin处理后表达明显下降。PDGF-DD明显提高耐药相关基因 FOXC2、twist、snail、nanog、oct4 mRNA水平， p53 siRNA处理后mRNA表达显著下降。 结论 PDGF-DD/PDGFR-β信号能诱导MDA-MB-231细胞发生阿霉素耐药，通过PI3K途径转录水平上调 hsp90 和 TopBP1 表达、稳定并促进突变型p53介导细胞耐药是其重要机制之一。