Shiga Toxin-producing Escherichia Coli (STEC) : development of an immuno-detection method and a direct-fed microbial to control their prevalence in cattle

Les Escherichia coli enterohemorragiques (EHEC) sont responsables de maladies graves comme la colitehemorragique (CH), le syndrome hemolytique et uremique (SHU) ou le purpura thrombotiquethrombocytopenique (PTT). Les infections humaines sont principalement dues a la consommationd’aliments contamines, en particulier la viande d’origine bovine, le lait ou les legumes. Le principalreservoir naturel des EHEC est le tractus gastro-intestinal (TGI) des bovins. Les feces de bovins sont, parconsequent, responsables de la contamination de plusieurs types d’aliments mais egalement de ladissemination environnementale de ces bacteries pathogenes. En relation avec cette problematique, lesdeux objectifs de ce projet etaient (i) de developper une nouvelle methode d’immuno-capture pourameliorer l’isolement des principaux serogroupes de EHEC impliques dans les infections humaines; et (ii)de developper un nouveau DFM (direct fed microbial) utilisable chez les bovins pour diminuer laprevalence des EHEC chez les animaux. Cette these a permis le developpement d’une methoded’immuno-capture basee sur l’utilisation d’une microplaque a 96 puits, coatee avec des anticorpsspecifiquement diriges contre E. coli O157 ou d’autres serogroupes. Cette methode, appelee immunomicroplatecapture (IMC) est efficace et facile d’utilisation pour l’isolement de souches d’E. coli O157 ;O26 ; O103 et O111 dans les produits alimentaires. L’IMC pourrait etre une alternative a l’utilisation desbilles immuno-magnetiques qui sont classiquement utilisees pour la detection des EHEC dans lesproduits alimentaires, mais qui representent une technique longue et fastidieuse lors de l’analysesimultanee de nombreux echantillons. La seconde partie de cette these a permis de selectionner 5souches de bacteries lactiques qui presentent une activite antagoniste vis-a-vis d’E.coli O157 et d’autresserogroupes in vitro. La resistance de ces souches aux conditions du tractus gastro-intestinal (conditionsacides, presence de sels biliaires, presence de jus de rumen) a ete evaluee in vitro. Leur innocuite a eteverifiee chez des souris Balb-C par l’administration de chacune des souches incorporees a la nourriture(109 cfu/g). Enfin, la lyophilisation des souches n’a pas affecte leur activite antagoniste in vitro. Lesresultats obtenus dans les differents tests in vitro suggerent que les 5 souches pourraientpotentiellement etre utilisees comme DFM chez les bovins pour diminuer la colonisation de leur TGI parles EHEC et par consequent diminuer le risque de contamination des aliments et le risque dedissemination environnementale.