Producción de tensioactivos con actividad antimicrobiana mediante el empleo de tecnologías amigables con el medio ambiente
2013
Papaina es una endopeptidasa extraida del latex de frutos de Carica papaya ampliamente empleada en las industrias alimentaria y farmaceutica. Es muy utilizada como biocatalizador en la sintesis de peptidos y otros derivados. Los surfactantes derivados de arginina son una familia de tensioactivos cationicos con propiedades antimicrobianas interesantes como preservativos para formulaciones farmaceuticas y alimentarias. El objetivo del presente trabajo fue la obtencion, purificacion y determinacion del poder antimicrobiano de un compuesto derivado de arginina con potencial actividad tensioactiva, sintetizado mediante el empleo de papaina como biocatalizador. La sintesis se llevo a cabo por condensacion del ester etilico de N ? -benzoil-arginina con dodecilamina como nucleofilo, utilizando papaina adsorbida sobre poliamida como biocatalizador y acetonitrilo con 0.25% (v/v) de agua como medio de reaccion. El producto (Bz-Arg-NHC 12 ) fue purificado mediante cromatografia de intercambio cationico utilizando como eluyente una mezcla de buffer borico-borato 0.01 M (pH 8.5)/etanol (1:1) y un gradiente en NaCl. Se ensayo la actividad antimicrobiana mediante el metodo de microdilucion frente a Salmonella enterica , Serratia marcescens , Shigella flexneri , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Bacillus cereus , Bacillus subtilis , Staphylococcus aureus , Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium , Kocuria rhizophila , Listeria innocua , Listeria monocytogenes , Pichia anomala, Saccharomyces cereviciae, Kluyveromyces marxianus y Rhodothorula sp., calculandose los porcentajes de inhibicion de crecimiento y las concentraciones inhibitoria minima (CIM) y bactericida minima (CBM). La sintesis de Bz-Arg-NHC 12 catalizada por papaina adsorbida en poliamida tuvo una conversion del 86.2%. Se determino la actividad antimicrobiana de una solucion acuosa de Bz-Arg-NHC 12 (60.0 ?g.ml -1 ) frente a distintas especies de bacterias y levaduras. Los microorganismos Gram positivos resultaron en general inhibidos en mas de un 90%, en tanto las bacterias Gram negativas y levaduras ensayadas fueron resistentes. El compuesto puro presento una CIM de 15.6 ?g.ml -1 para B. cereus , 62.5 ?g.ml -1 para St. aureus y 250.0 ?g.ml -1 para E. coli, en tanto que no afecto el crecimiento de Ps. aeruginosa . Las CBM fueron 250.0 ?g.ml -1 , 62.5 ?g.ml -1 y 250.0 ?g.ml -1 para B. cereus, St. aureus y E. coli respectivamente.
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